Extraccion de ADN del higado de pollo

Extracción de ADN del hígado de pollo Materiales: • Trocitos de hígado de pollo • Solución de NaCl 2M • Detergente líquido para vajilla • Alcohol etílico 96° • Mortero • Embudo • Varilla de vidrio • Dos vasos de precipitado de 250 cm3 • Un trozo de gasa • Gotero • Portaobjetos y cubreobjetos • Microscopio Óptico Objetivos: • Extraer o aislar ADN en cantidad suficiente para que lo podamos reconocer a simple vista • Diseñar un póster para exponer la experiencia. Procedimiento: 1. Reúnan en la mesa de laboratorio, todos los materiales indicados. 2. Trituren en un mortero trocitos de hígado de pollo en 50 cm3 de agua de la canilla. Con este procedimiento, logran romper la membrana plasmática y liberar el núcleo de cada una de las células del hígado empleado. 3. Filtren varias veces usando un trozo de gasa de trama cerrada. De esta forma, se separan los restos de tejidos que no lograron desprender sus núcleos. 4. Si obtuvieron 100 ml del filtrado por el procedimiento anterior, agreguen el mismo volumen, es decir 100 ml, de una solución de NaCl 2M. 5. Al colocar el filtrado en una solución salina, se provoca la ruptura de la membrana nuclear, y, de esta manera, la cromatina queda libre. A continuación, agreguen 1 cm3 de detergente de vajilla. Su acción permite que se desarmen las bicapas lipídicas que forman las membranas de los organoides celulares y que se desprendan las proteínas que acompañan la estructura del ADN. 6. Agreguen alcohol con la pipeta. Traten de que el alcohol se deslice suavemente por las paredes del vaso de precipitado. Presten atención y vean a la luz levantando el vaso. En él, podrán observar dos fases o capas definidas. Entre ambas, reconocerán el ADN. 7. Introduzcan la varilla de vidrio y revuelvan siempre en la misma dirección durante unos minutos. 8. Verán a simple vista cómo se adhieren finas fibras blancas sobre la varilla de vidrio. 9. Con la ayuda de la varilla de vidrio, retiren algunas de esas fibras; apóyenlas en un portaobjetos y obsérvenlas al microscopio óptico.